二、Cre-loxP的应用
携带 loxP 的小鼠被称为 Floxed 小鼠,当它与 Cre 小鼠交配后,Cre-Lox 系统开始工作,可以对两个 loxP 位点以内的基因进行重组,进而实现基因敲除、表达等目的。
1. 组织特异性敲除(conditional knockout, cKO)
当组织特异性 Cre 小鼠(具有组织靶向性的 Cre 小鼠品系很多)与 Floxed 小鼠配繁后,两个 loxP 位点位于同一条染色体上,且方向相同。Cre 重组酶可以介导特定组织中两个同向 loxP 位点发生同源重组。致使“Gene X”处序列被删除,如果该序列的删除使得该基因发生移码突变,则达到基因敲除的效果(如图2)。
2. 组织特异性过表达(conditional knockin, cKI)
Floxed 小鼠转入某个基因的编码序列,并在这段编码序列前面插入“LoxP-STOP-LoxP, LSL”元件。因此,该Floxed小鼠并不表达插入的基因;当存在Cre重组酶时,STOP元件被删除,插入基因才会表达。该体系可用于构建基因条件性敲入小鼠模型(如图3)。
KO 杂合子 Gene+/-
CKO 杂合子 Gene flox/+
我还是没搞懂这两个区别,回去问ai吧
我就不应该先问师兄师姐的,因为问了一圈他们都没搞这个所以不知道,到头来还是要问AI